在臨床輸液治療中，注射劑常常需要與注射液、葡萄糖等溶媒配伍使用。然而，配伍操作會破壞原包裝的密封性，藥液暴露于空氣中，存在被微生物污染的風(fēng)險。如果配伍后的藥液本身不具備抑制污染菌生長的能力，那么一旦有少量細菌或真菌進入，就可能在存放期間大量繁殖，最終輸入患者體內(nèi)，引發(fā)嚴(yán)重感染。

為此，藥品研發(fā)和穩(wěn)定性研究中引入了一項專門的檢測手段——注射劑配伍微生物挑戰(zhàn)試驗。它的核心思路是：人為地向配伍后的藥液中加入一定數(shù)量的已知標(biāo)準(zhǔn)菌株，模擬臨床配制過程中可能發(fā)生的污染，然后在規(guī)定的存放條件和時間節(jié)點，觀察這些微生物是死亡、存活還是繁殖，從而評估藥液對微生物的抑制或促進效果。

注射劑配伍微生物挑戰(zhàn)  試驗具體操作方法一般包括以下步驟：

第一步，根據(jù)臨床實際用法，用指定的輸液溶媒配制供試藥液，濃度和存放容器均與臨床使用一致。

第二步，選擇具有代表性的挑戰(zhàn)菌種。通常包括大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等革蘭氏陰性及陽性細菌，以及白色念珠菌、黑曲霉等真菌。這些菌種均為藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)菌株。

第三步，將制備好的菌懸液定量接種到供試藥液中，使初始污染菌濃度達到每毫升10的5次方至10的6次方個菌落形成單位（CFU/mL），這是一個遠高于實際可能污染水平的數(shù)量，目的是驗證藥液在最壞情況下的抑菌能力。

第四步，將接種后的藥液放置在設(shè)定的存放條件下，例如2~8℃冷藏或25℃室溫，并在0小時、4小時、24小時、48小時等預(yù)設(shè)時間點取樣，測定樣品中的活菌數(shù)量。

第五步，將各時間點的活菌數(shù)與初始接種量進行比較。如果活菌數(shù)在測試時間內(nèi)沒有增加，甚至明顯減少，說明該藥液具有較好的抑菌效果；反之，如果活菌數(shù)顯著增長（例如增長超過0.5個對數(shù)單位），則說明藥液無法有效控制污染菌，需要在配伍后較短的時間內(nèi)用完，或嚴(yán)格采用無菌操作配制。

根據(jù)國家藥品審評機構(gòu)的最新指導(dǎo)原則，當(dāng)配伍后藥液需在2~8℃下保存超過24小時，或在25℃下保存超過4小時時，均建議進行此項試驗。該檢測方法為臨床用藥的安全時限提供了直接的數(shù)據(jù)支撐，有助于制定合理的配制、儲存和輸注操作規(guī)范。